注意事項(xiàng):
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行。設(shè)立一個的PCR實(shí)驗(yàn)室。
２．純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言，只要能夠得到可靠的結(jié)果，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。產(chǎn)品僅用于科研操作過程中均應(yīng)戴手套。
４．PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水，采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
５．試劑都應(yīng)該以大體積配制，試驗(yàn)一下是否滿意，然后分裝成僅夠一次使用的量儲存，從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
６．試劑或樣品準(zhǔn)備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
７．PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開，并且要充分混勻。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：副結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒價格
英文名稱：Mycobacterium paratuberculosisPCR
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，產(chǎn)品僅用于科研按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研典型的PCR由（1）高溫變性模板；（2）引物與模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng)，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。其主要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合，兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
副結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒價格原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍，使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
硅油Ⅲ/苯甲基硅油274/甲基苯基硅油/45%苯基/甲基苯基硅油III/苯基甲基硅油III/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Silicone色固100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，63148-62-9RT

甲基硅油/二甲基硅油/硅油/聚硅氧烷/二甲聚硅氧烷/有機(jī)硅油/二甲基(硅氧烷與聚硅氧烷)/硅酮/有機(jī)硅樹脂/甲基硅樹脂/聚二甲基硅氧烷/硬泡硅油/Dimethylsilicone fluidBR500毫升，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，63148-62-9RT

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甲基硅油I/甲基硅油201-350/Methylsilicone oil I色固100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，RT

碳酸鍶/菱鍶礦/Strontium carbonateAR，99%500克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，1633-05-2RT

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堿式碳酸鎳/碳酸鎳/[碳酸(2-)]四羥基三鎳/碳酸鎳氫氧化物/Nickel(II) carbonate basic tetrahydrateAR，44%250克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，12607-70-4RT

氟化鎳/二氟化鎳/氟化亞鎳/四水合氟化鎳(II)/Nickel(II) fluoride tetrahydrateCP，30%250克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，13940-83-5RT

草酸鎳/乙二酸鎳/草酸鎳(II)二水合物/Nickel oxalate dihydrateBR，31%50克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，6018-94-6RT

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副結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒價格Poly(styrene) 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Lithium hydroxide 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

4-Amino-6-nitroresorcinol hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Sennoside D 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

Methyl 2,4-dihydroxybenzoate 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

3-CYCLOHEXYL-1-PROPYNE 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

BISMUTH SULFATE 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

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