MCF-7人乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

公司正在出售的產(chǎn)品：

腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

FBXL20： FBXL20蛋白抗體 細(xì)胞名稱 種屬

HUtSMC-c 人類子宮平滑肌細(xì)胞(HUtSMC) 500,000cells 原代心肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝：500/250/100ml 兔子瘦素(LEP)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

FBXL15： FBXL15蛋白抗體 CM-H024人胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

A-498(人腎癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 兔子醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA 試劑盒 IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml

MAD1： 有絲分裂抑制缺陷蛋白1抗體 HAVCR1 Others Human 人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0443SK-N-MC(人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 大鼠硝基酪酸()ELISA試劑盒 NE (Rabbit neutrophil elastase)  兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶 96T

10-Mar： 膜相關(guān)環(huán)指蛋白10抗體 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記);DG6-GFP

NCI-H524(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MCF7(癌細(xì)胞) 大鼠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)ELISA試劑盒 Bacillus thuringiensis,BT  蘇云金芽孢桿菌蛋白 96T

MALT1： 粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-I

MCF-7人乳腺癌細(xì)胞HaCaT細(xì)胞，人正常皮膚細(xì)胞 淋病柰瑟氏菌 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達(dá));DG6-VAP33-GFP 人反狀腺原酸(3)ELISA 試劑盒 FoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子)抗原 0.5mg

HHV8 ORF50： 人類皰疹病毒8抗體 JAG1 Others Human 人 JAG1 / JAGL1 / CD339 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1 人發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)ELISA 試劑盒 FOXM1/HFH 11 peptide 插頭蛋白M1抗原 0.5mg

H2N2 Hemagglutinin： 甲型流感病毒血凝素抗體 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM0501

MDA-MB-231(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA 試劑盒 Measles virus of fusion protein 麻疹病毒抗原(麻疹病毒融合蛋白) 0.5mg

注意事項(xiàng)：

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。