傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

HTB-80人胰腺癌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

ALVA細胞，人前列腺癌細胞 大鼠氣管上皮細胞,RTE細胞 大鼠腦膜細胞RMC 人衰變加速因子(DAF/CD55)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

G gamma14： G蛋白偶聯(lián)受體γ14抗體 SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 人細胞裂解液 (陽性對照)

CM-R017大鼠胰腺導管上皮細胞培養(yǎng)基100mL 人鼠嗜酸粒細胞趨化因子(ECF)ELISA 試劑盒 IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml

GLP 2： 腸高血糖素相關(guān)肽抗體 SGC-7901, 人胃腺癌細胞系 Human

A-375(人惡性黑色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H123人神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基100mL 人胚肺二倍體細胞;KMB-17 人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)ELISA 試劑盒 IgM/Bio 標記的兔抗小鼠IgM 0.3ml

Nck beta： NCK銜接蛋白2抗體 皮膚肥大細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

AGS人胃腺癌細胞 AGS human gasic cancer cells F-12+10% FBS 大鼠內(nèi)皮素受體B(EB)ELISA試劑盒 GIP  大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽 96T

NPHS2： 腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體 ACVR2B Others Mouse 小鼠 ACVR2B 人細胞裂解液 (陽性對照)

婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-3 大鼠內(nèi)皮素受體A(E-A)ELISA試劑盒 UBC(Human urinary bladder cancer antigen)  人膀胱癌抗原 96T

NMT1： 豆蔻?；D(zhuǎn)移酶1抗體 中國倉鼠肺細胞;V79

HTB-80人胰腺癌細胞KLHL14： Kelch樣蛋白14抗體 CA4 Others Mouse 小鼠 Car4 / CA4 / CAIV 人細胞裂解液 (陽性對照)

人骨骼肌成肌細胞裂解物HSkMML 綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA 試劑盒 CD339/Jagged1 CD339/Jagged1抗原 0.5mg

KLHL31： Kelch樣蛋白31抗體 人結(jié)直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]

CAL-27(人舌鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1ml 綿羊白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒 C-fos 即刻早期基因(一種原癌基因)抗原 0.5mg

KLHL32： Kelch樣蛋白32抗體 人間充質(zhì)干細胞-肝