傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度，當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶?jī)?nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過(guò)度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

MDA-kb2人正常乳腺細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無(wú)菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無(wú)菌，且須在無(wú)菌超凈工作臺(tái)中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長(zhǎng)。來(lái)源于不同動(dòng)物種類、組織類型的細(xì)胞，對(duì)培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對(duì)于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過(guò)短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過(guò)小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過(guò)大對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過(guò)程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

HCAEC Pellet 人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 口腔角質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)添加物OKGS 人脂蛋白a(Lp-a)ELISA試劑盒 IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

phospho-GFAP (Ser8)： 0酸化膠質(zhì)纖維酸性蛋白抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B1

SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)ELISA 試劑盒 IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

phospho-GABBR2 (Ser783)： 0酸化G基B型受體2抗體 COLEC10 Others Cynomolgus 食蟹猴 COLEC10 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(懸浮生長(zhǎng))總RNAHOPC-os NA 人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RAES/CCL5)ELISA 試劑盒 IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml

Nidogen 2： 巢蛋白NID2抗體 SAC-IIC3細(xì)胞，腹水瘤細(xì)胞 人結(jié)腸癌細(xì)胞,CACO-2細(xì)胞 斑馬魚尾鰭細(xì)胞;AB.9

ST6GALNAC2 Others Mouse 小鼠 STHM / ST6GALNAC2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF1)ELISA試劑盒 IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1)  人結(jié)合蛋白1 96T

NHEDC2： 線粒體/氫交換蛋白質(zhì)2抗體 小膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)添加物MGS

EC9706人食管癌細(xì)胞 Human esophageal cancer cell line EC9706. DMEM+10%FBS 大鼠酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(aFGF/FGF-1)ELISA試劑盒 ADRA1A  大鼠能a1A受體 96T

Neurogenin 1： 神經(jīng)元素1抗體 ACVR1 Others Mouse 小鼠 ALK-2 / ACVR1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

MDA-kb2人正常乳腺細(xì)胞IL-1RA： 白介素-1受體拮抗劑抗體 恒河猴腎細(xì)胞;RM-1 人胰腺癌細(xì)胞，HPAC細(xì)胞 SGC-7901(胃腺癌細(xì)胞)

CD68 Others Rat 大鼠 CD68 / Macrosialin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 人ω干擾素(IFN-ω)ELISA 試劑盒 PDGF-BB peptide 血小板源性生長(zhǎng)因子-BB抗原 0.5mg

IKK gamma： KB抑制蛋白激酶γ抗體 CM-H022人前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

SP2/0-Ag14細(xì)胞，鼠骨髓瘤細(xì)胞 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纖維細(xì)胞) 人羊膜細(xì)胞;WISH 人γ肽(Pγ)ELISA 試劑盒 Pdx1(pancreatic and duodenal homeobox 1) 胰十二指腸同源異型盒基因抗原 0.5mg

phospho-IKK gamma (Ser85)： 0酸化KB抑制蛋白激酶γ抗體 IL12A Others Human 人 IL12A / NKSF1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)