型 號
產(chǎn)品時間2024-02-17
所屬分類大鼠細(xì)胞系
報價1500
9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞
細(xì)胞基本屬性：
產(chǎn)品名稱 | 9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞（種屬鑒定正確） | 年齡性別 | 雄性 |
種屬 | 大鼠 | 組織來源 | 腦，膠質(zhì)細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁生長 |
凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲存 |
細(xì)胞詳細(xì)介紹：
細(xì)胞別稱 9L/lacZ；大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞 背景簡介;9L/lacZ細(xì)胞株1989年從9L細(xì)胞株（大鼠誘導(dǎo)的膠質(zhì)瘤細(xì)胞株）發(fā)展而來。 用攜帶E. coli編碼beta-半乳糖苷酶lacZ基因和帶來G418抗性的Tn5基因BAG復(fù)制缺陷的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體感染9L細(xì)胞株。 細(xì)胞在G418存在下培養(yǎng)14天，克隆，并檢測beta-半乳糖苷酶生成。 9L/lacZ產(chǎn)生高水平的酶，選擇其進(jìn)行后續(xù)研究。 細(xì)胞持續(xù)表達(dá)lacZ報告基因產(chǎn)物，從E. coli衍生來的beta-半乳糖苷酶，從而可以通過組織切片的組織化學(xué)染色來鑒定單個腫瘤細(xì)胞。 同一片子上的淋巴細(xì)胞和其它響應(yīng)細(xì)胞也可以通過雙標(biāo)記抗體進(jìn)行鑒定。 染色細(xì)胞和背景的對比有益于圖像分析。 這是少數(shù)允許量化分析的大腦微觀腫瘤模型中的一種。 這種腫瘤模仿了人類大腦腫瘤的生長和傳播的重要特性。 beta-半乳糖苷酶的表達(dá)十分穩(wěn)定，但細(xì)胞培養(yǎng)數(shù)月后應(yīng)該重新進(jìn)行克隆。 細(xì)胞代數(shù);10代以內(nèi) 細(xì)胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 支原體檢測;無 保藏機構(gòu);ATCC; CRL-2200 培養(yǎng)基;90%DMEM+10%FBS+PS 培養(yǎng)條件;氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ 凍存條件無血清凍存液，液氮儲 發(fā)貨方式復(fù)蘇發(fā)貨（免運輸費用）/ 凍存發(fā)貨（需加干冰運輸費用） 順豐快遞 供應(yīng)限制僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用 特別說明以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主 |
二、懸浮細(xì)胞
傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
一般實驗室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時，即可進(jìn)行傳代。
（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。
（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。
（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實驗進(jìn)度。
（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。
（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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周期素H抗體
含SHC結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白1樣抗體
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伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體
磷酸化雌激素受體α抗體
CWC22蛋白抗體
9L/lacZ大鼠膠質(zhì)肉瘤細(xì)胞氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體
傳代培養(yǎng)操作步驟：
一、貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
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